泉州市2023届高中毕业班质量监测(三)物理试题试卷 答案(更新中)

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【答案】(1)使双链DNA解聚为单链热稳定DNA聚合（或Tag)(2)Cla I DNA连接A、D(3)基因表达载体四环素(4)将目的基因导入受体细胞(5)抗原一抗体杂交【解析】(1)PCR扩增过程中，需加热至90~95℃，其目的是使双链DNA解聚为单链；加热至70~75℃时，互补链可在Tag酶的作用下延伸。(2)用限制酶ClaI和DNA连接酶处理两个基因后，得到A、D端相连的融合基因。(3)将融合基因插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建表达载体即重组质粒并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基振荡培养，可以得到用于转化的侵染液。(4)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入受体细胞。(5)用分子杂交技术确定融合基因是否完成了转录，产生了RNA;用抗原一抗体杂交法可检测转基因油莱植株中的融合基因是否成功表达。

【答案】(1)引物b、引物c(2)引物b和引物C对应的碱基之间大部分可以配对，在一个反应系统中配对后会失效(3)①逆（反）转录酶、热稳定DNA聚合酶（或Tag酶）②离心(4)①试剂盒中的原料、引物和探针数量一定，超出一定的循环数后，荧光标记的“杂交双链”不再增加②阳甲样本中的新冠病毒含量更高，达到阈值所需的循环数更少【解析】(1)由图中信息可知，定点突变位，点在引物b和引物c的结合位，点处，而引物a与引物b是合成产物AB的引物，引物c和引物d是合成产物CD的引物，因此需要设计引物b和引物c,使它们不发挥作用才可以得到突变产物AD。(2)引物是一段DNA,引物b和引物c对应的碱基之间大部分可以配对，在一个反应系统中配对后会失效。(3)①新冠病毒是RNA病毒，因此在进行RT-PCR时，需要先进行逆转录合成DNA,然后再进行PCR,因此需要逆转录酶，而RT-PCR过程中除原料、模板、能量外，还需要热稳定DNA聚合酶（或Tag酶）以合成子链DNA。②向徽量离心管中加入成分时需要用微量移液器；加入到微量离心管后使反应液集中到微量离心管底部的方法是离心。(4)①平台期是由于随着循环次数增加，试剂盒中的原料、引物和探针被消耗完，超出一定的循环数后，荧光标记的“杂交双链”不再增加。②检测过程中有杂交双链，说明样本中有与病毒核酸相同的核酸序列，因此结果为阳性；两个样本中，甲样本的口点比乙样本明显左移，说明甲样本中的新冠病毒含量更高，达到阙值所需的循环数更少。