全国100所名校单元测试示范8月百万联考答案

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5.(8分，每空1分)(1)烟草细胞是真核细胞，能够合成hFIX并对其进行加工和修饰，而大肠杆菌是原核细胞，无法对产生的hFTX进行加工(2)化学方法或人工合成有的氨基酸有多种密码子与之相对应，因此由同一氨基酸序列可以得到多种RNA碱基排列顺序，进而可推测出多种基因碱基序列(3)标记基因鉴别受体细胞中是否含有hFIX基因，从而将含有hFIX基因的细胞筛选出来（或重组DNA的筛选与鉴定)(4)植物组织培养(5)将转基因烟草制成匀浆后提取蛋白质，用抗hFIX的抗体进行抗原一抗体杂交，观察是否出现杂交带hFIX基因在转基因烟草基因组中的拷贝数不同；hFIX基因在转基因烟草基因组中的整合位置不同【解析】(1)凝血IX因子基因是真核生物体内的基因，烟草细胞是真核细胞，能够合成hFIX并对其进行加工和修饰，而大肠杆菌是原核细胞，无法对产生的hFIX进行加工，因此科研人员选择烟草细胞作为受体细胞，而未选择大肠杆菌。(2)由已知的hFIX氨基酸序列，可以推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对的原则，推测出它的基因的核苷酸序列，再通过化学方法或人工合成得到hFIX基因。由于有的氨基酸有多种密码子与之相对应，因此由同一氨基酸序列可以得到多种RNA碱基排列顺序，进而可推测出多种基因碱基序列，因此用该方法得到的hFIX基因碱基排列顺序可以有多种。(3)基因表达载体的组成：目的基因十启动子十终止子十标记基因，转化烟草的基因表达载体的组成除了启动子、hFIX基因和终止子之外，还需具有的结构是标记基因。其中启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；标记基因便于目的基因的鉴定和筛选，鉴别受体细胞中是否含有hFIX基因，从而将含有hFIX基因的细胞筛选出来（或重组DNA的筛选与鉴定）。(4)目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，目的基因导入受体细胞后，经植物组织培养过程最终获得四株转hFIX基因的烟草。(5)检测hFIX基因是否翻译成hFIX的方法是抗原一抗体杂交法，主要步骤是将转基因烟草制成匀浆后提取蛋白质，用抗hFX的抗体进行抗原一抗体杂交，观察是否出现杂交带。hFIX基因在转基因烟草基因组中的拷贝数不同；hFIX基因在转基因烟草基因组中的整合位置不同，因此hFIX基因在不同转基因烟草中的表达存在较大的差异。

非选择题1.(6分，每空1分)(1)多(2)磷酸二酯键DNA连接酶(3)A、B、D(4)①生长素和细胞分裂素【解析】(1)DNA分子中A一T之间有2个氢键，G一C之间有三个氢键，故该结构中碱基对A一T的比例多，DNA分子不稳定，利于DNA分子的解螺旋。(2)限制酶切割的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键；基因表达载体的构建除限制酶参与外，还需要DNA连接酶的参与。(3)将上述切开的质粒与目的基因混合，加入DNA连接酶连接后，导人受体细胞的可能有重组质粒或不含目的基因的质粒或不含有质粒。BamH I和Sa3AI都会破坏质粒上的Y抗性基因。若受体细胞含有不含目的基因的质粒，不含目的基因的质粒上含有X和Y抗生素抗性基因，故受体细胞可能抗X和抗Y;若受体细胞含有重组质粒，重组质粒含有X抗生素抗性基因，所以受体细胞可能抗X而对Y敏感（不抗Y);如果受体细胞不含有质粒，受体细胞两种抗性都没有。故选A、B、D项。(4)图3中①将目的基因导入受体细胞，发生了基因重组，故基因重组发生在图3中①；图3过程②、③表示是植物组织培养过程，该过程中需要调控好生长素和细胞分裂素的比例，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。